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納米抗體技術(shù)

Nanoantibody Discovery

羊駝駱駝免疫

羊駝基地

點(diǎn)擊收起

免疫服務(wù)流程

  • 抗原乳化

    01

    根據(jù)抗原體積加入等體積的弗氏佐劑充分混勻進(jìn)行乳化。性狀:乳白色乳劑，滴水不擴(kuò)散

  • 免疫

    02

    采血部位：頸部淋巴結(jié)附近左右兩側(cè)

    免疫前乳劑要恢復(fù)至室溫免疫后觀察羊駝狀態(tài)良好無(wú)不適癥狀。

    免疫部位:頸部淋巴結(jié)附近左右兩側(cè)

  • PBMC分離

    03

    采集50 mL血液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，并保存于RNAiso Plus中

免疫周期表

免疫操作時(shí)間節(jié)點(diǎn)常規(guī)采血/免疫劑量免疫方式佐劑
免疫前采血第0-2天采血(5 mL)//
初次免疫第0-2天500 μg頸部淋巴結(jié)附近左右兩側(cè)注射Sigma Adjuvant
二次免疫第17天500 μg頸部淋巴結(jié)附近左右兩側(cè)注射Sigma Adjuvant
三次免疫第31天500 μg頸部淋巴結(jié)附近左右兩側(cè)注射Sigma Adjuvant
四次免疫第45天500 μg頸部淋巴結(jié)附近左右兩側(cè)注射Sigma Adjuvant
血清滴度測(cè)定PBMC分離第52天采血(50 mL)//

四次免疫后抗體效價(jià)檢測(cè)

稀釋倍速未免一免二免三免四免

2000

0.066

0.551

1.251

2.338

3.968

4000

0.065

0.377

0.771

1.422

3.096

8000

0.059

0.293

0.469

0.99

2.301

16000

0.061

0.219

0.354

0.673

1.724

32000

0.059

0.129

0.245

0.461

1.157

64000

0.067

0.093

0.103

0.321

0.741

128000

0.061

0.068

0.072

0.189

0.445

blank

0.054

0.064

0.04

0.1

0.189

實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析和討論

① 羊駝在一至四次免疫后抗體效價(jià)依次增高，表明其針對(duì)抗原產(chǎn)生的免疫應(yīng)答隨免疫次數(shù)逐漸增強(qiáng)
② 第四次免疫后免疫效價(jià)達(dá)到105，符合建庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)，可以對(duì)羊駝進(jìn)行采血分離PBMC并進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)

交付內(nèi)容:

① 抗體效價(jià)檢測(cè)報(bào)告
② 每次免疫后的血漿
③ 保存在Trizol中的PBMC(外周血單個(gè)核細(xì)胞)

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